QuantiTect Primer Assays是生物信息学验证的全基因组引物对,可在任何PCR仪上进行基于SYBR Green的real-time RT-PCR。引物对覆盖所有人类、小鼠、大鼠和其他各类生物的基因。每个QuantiTect Primer Assay包含特定基因的正反引物对,以冻干粉形式提供,经重悬可获得10倍稀释的引物溶液(real-time RT-PCR反应液组分需单独订购)。QuantiTect Primer Assays配合QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane Kit进行SYBR Green检测,可在real-time RT-PCR中确保高特异性和灵敏度的结果,其表现与探针法检测相当。
QuantiTect Primer Assays在很大模板浓度范围内确保高效定量分析RNA转录本(参见下图的A部分)。应用QuantiFast SYBR Green Kit或其他QIAGEN SYBR Green试剂盒可确保精确的定量分析。该试剂盒可避免形成PCR人工产物(参见下图的B部分)。
配合QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane SYBR Green Kit(用于两步或一步法RT-PCR的预混液)的分析方法与探针法分析相比,CT值可能更低(参见下图)。这得益于试剂盒的高PCR特异性,以及SYBR Green染料与每个PCR产物的多重结合。即使处理低丰度转录本也可进行高灵敏度的定量分析。
应用QuantiTect Primer Assays无需反复验证real-time RT-PCR引物(参见下图)。可用于一步和两步法定量RT-PCR。只需登陆QIAGEN GeneGlobe,选择和订购靶基因的引物对。引物对覆盖所有人类、小鼠、大鼠、果蝇、拟南芥和其他各类生物基因。QuantiTect Primer Assays配合QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane SYBR Green Kit(用于两步或一步法RT-PCR的预混液)能提供可靠的结果。
每个QuantiTect Primer Assay包含特定基因的正反引物对,以冻干粉形式提供。在pH8.0的条件下经重悬获得10倍稀释的引物溶液,然后可加入QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane试剂盒提供的预混液,进行SYBR Green法检测。将含有引物的预混液装入PCR反应管或孔板,然后加入单个模板样本。
QuantiTect Primer Assays与表中试剂盒配合使用,可获得可靠的结果。
QuantiTect Primer Assays适用于检测RNA。当无法避免基因组DNA污染时,可使用 QuantiTect Reverse Transcription Kit或FastLane Cell cDNA Kit制备cDNA。这两种试剂盒在合成cDNA的同时,可去除基因组DNA污染。
命名
基因的 QuantiTect Primer Assay均以数字命名区分,数字位于产品名中基因符号之后。更多详情请参照GeneGlobe FAQs。
QuantiTect Primer Assays适用于利用SYBR Green检测技术、一步或两步法定量RT-PCR进行基因表达分析。非常适合于以下应用:
· 验证siRNA介导的基因沉默
· 验证微阵列结果
· 高通量筛查
Features | Specifications |
Applications | Gene expression analysis |
Kit for this application on the instrument | QuantiFast SYBR Green PCR or RT-PCR Kit, QuantiTect SYBR Green PCR or RT-PCR Kit |
Detection | SYBR Green I |
Real-time or endpoint | Real-time |
Species | Human, mouse, rat, drosophila arabidopsis, chicken, dog |
Format | Lyophylized primer set |
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