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特点
- · 适用于全基因组的预制引物确保结果可靠
- · PCR效率接近100%，可靠的定量检测
- · 灵敏度高、特异性好
- · 宽线性范围内的准确定量检测
- · SYBR Green检测方法可节约时间和成本
产品详情
QuantiTect Primer Assays是生物信息学验证的全基因组引物对，可在任何PCR仪上进行基于SYBR Green的real-time RT-PCR。引物对覆盖所有人类、小鼠、大鼠和其他各类生物的基因。每个QuantiTect Primer Assay包含特定基因的正反引物对，以冻干粉形式提供，经重悬可获得10倍稀释的引物溶液（real-time RT-PCR反应液组分需单独订购）。QuantiTect Primer Assays配合QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane Kit进行SYBR Green检测，可在real-time RT-PCR中确保高特异性和灵敏度的结果，其表现与探针法检测相当。
性能
QuantiTect Primer Assays在很大模板浓度范围内确保高效定量分析RNA转录本（参见下图的A部分）。应用QuantiFast SYBR Green Kit或其他QIAGEN SYBR Green试剂盒可确保精确的定量分析。该试剂盒可避免形成PCR人工产物（参见下图的B部分）。
配合QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane SYBR Green Kit（用于两步或一步法RT-PCR的预混液）的分析方法与探针法分析相比，CT值可能更低（参见下图）。这得益于试剂盒的高PCR特异性，以及SYBR Green染料与每个PCR产物的多重结合。即使处理低丰度转录本也可进行高灵敏度的定量分析。
原理
应用QuantiTect Primer Assays无需反复验证real-time RT-PCR引物（参见下图）。可用于一步和两步法定量RT-PCR。只需登陆QIAGEN GeneGlobe，选择和订购靶基因的引物对。引物对覆盖所有人类、小鼠、大鼠、果蝇、拟南芥和其他各类生物基因。QuantiTect Primer Assays配合QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane SYBR Green Kit（用于两步或一步法RT-PCR的预混液）能提供可靠的结果。
操作流程
每个QuantiTect Primer Assay包含特定基因的正反引物对，以冻干粉形式提供。在pH8.0的条件下经重悬获得10倍稀释的引物溶液，然后可加入QuantiFast、QuantiTect、Rotor-Gene或FastLane试剂盒提供的预混液，进行SYBR Green法检测。将含有引物的预混液装入PCR反应管或孔板，然后加入单个模板样本。
QuantiTect Primer Assays与表中试剂盒配合使用，可获得可靠的结果。
QuantiTect Primer Assays适用于检测RNA。当无法避免基因组DNA污染时，可使用 QuantiTect Reverse Transcription Kit或FastLane Cell cDNA Kit制备cDNA。这两种试剂盒在合成cDNA的同时，可去除基因组DNA污染。
命名
基因的 QuantiTect Primer Assay均以数字命名区分，数字位于产品名中基因符号之后。更多详情请参照GeneGlobe FAQs。
应用
QuantiTect Primer Assays适用于利用SYBR Green检测技术、一步或两步法定量RT-PCR进行基因表达分析。非常适合于以下应用：
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· 验证siRNA介导的基因沉默
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· 验证微阵列结果
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· 高通量筛查
参数
| Features | Specifications |
| Applications | Gene expression analysis |
| Kit for this application on the instrument | QuantiFast SYBR Green PCR or RT-PCR Kit, QuantiTect SYBR Green PCR or RT-PCR Kit |
| Detection | SYBR Green I |
| Real-time or endpoint | Real-time |
| Species | Human, mouse, rat, drosophila arabidopsis, chicken, dog |
| Format | Lyophylized primer set |
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