产品简介
GBSS(EC 2.4.1.21)以束缚态存在于淀粉体中,催化淀粉链的加长反应,主要负责直链淀粉的合成。
GBSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP;进一步通过反应 体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH,其中NADPH生成量 与前一步反应生成的ADP数量呈正比,通过340nm下测定NADPH的增加量,可以计算GBSS活性。
溶液的配制
1、 试剂四:临用前每支加入 5 mL 试剂一。
2、 试剂五:临用前每支加入 8 mL 试剂一。
3、 试剂六:临用前取 1 支加入 208 μL 双蒸水,充分溶解备用,用不完的试剂 4℃保存。
4、 试剂八:每支临用前加入溶解好的 4 mL 试剂四。
5、 反应液Ⅰ的配制:临用前在试剂二中加入 7 mL 试剂一,缓慢加热,逐渐升温使其溶解,冷却后加入试剂 三混合溶解,这样可以分两批配制并且测定。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
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