产品简介
糖原合成酶(Glycogen synthase , GCS)将UDPG的糖基加到原有糖原或是糖原蛋白的非还原端,以α-1,4糖苷 键连接。
GCS是动物机体糖原合成过程的限速酶,同时也是胰岛素作用的主要靶酶,在糖代谢及维持血糖相对稳 定的过程中有着重要作用。 GCS催化UDPG和葡萄糖残基生成糖原和UDP,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH生成NAD+, 在340 nm下测定NADH的下降速率,即可反映GCS活性。
溶液的配制
1、 试剂四:提供一个 5 mL 试剂瓶,用前取 1 支加入 3mL 试剂一充分溶解,-20℃分装保存 4 周,避免反复 冻融;
2、 试剂五:提供一个 5 mL 试剂瓶,用前取 1 支加入 3mL 试剂一充分溶解,-20℃分装保存 4 周,避免反复 冻融;
3、 工作液的配制:临用前将试剂三离心,取 20 μL 试剂三,加 14 mL 试剂一、3 mL 试剂四、3mL 试剂五, 充分混合(约 26T),现用现配,也可根据样本量按比例配制;
4、 试剂八的配制:
(1) 临用前取 1 瓶试剂八中加入 6mL 试剂二充分溶解,再将 1 支试剂七转移到试剂八中混合溶解后待 用,可-20℃分装保存 4 周,避免反复冻融;
(2) 用前先将试剂六离心,取 55 μL 试剂六加入 5.74 mL 上述(1)中溶液,充分混合(约 28T),现 用现配,也可根据样本量按比例配制。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计、低温台式离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、超声破碎仪、研钵/匀浆器、 冰和蒸馏水。
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