•     · cDNA合成和gDNA去除仅用20分钟完成
•     · 即便是低丰度的转录本也能获得高产量的cDNA
•     · 转录本的5'和3'端区域都可以进行cDNA合成
•     · 无需设计RNA特异性引物或探针

QuantiTect Reverse Transcription Kit通过方便快速的操作过程进行cDNA合成，并有效去除基因组DNA。应用gDNA Wipeout Buffer可高效去除RNA样本中的基因组DNA污染。QuantiTect Reverse Transcription Kit提供所有快速、高效逆转录所需的组分，包括Quantiscript Reverse Transcriptase、Quantiscript RT Buffer和独特的RT Primer Mix。合成的cDNA经过优化可用于real-time PCR，实现对mRNA转录本所有区域的靶分子进行可靠的定量检测。

使用QuantiTect Reverse Transcription Kit，基因组DNA污染物可使用独特的gDNA Wipeout Buffer迅速有效的去除。去除基因组DNA对于准确的基因表达结果非常重要，而并不总是可以设计RNA特异性引物或探针。使用gDNA Wipeout Buffer可节省时间和费用，因为纯化RNA样品过程中或纯化后均无需另外采用DNase消化。

Quantiscript Reverse Transcriptase的高RNA亲和性配合Quantiscript RT Buffer可从各种RNA模板中获得高产量cDNA（见表“低丰度转录本可获得较高产量的cDNA”）。即使复杂的模板也能成功逆转录，如GC含量高或有复杂二级结构的模板。

使用不同量的RNA对IL12A和IL1RN 进行两步法Real-time RT-PCR分析。使用 QuantiTect Reverse Transcription Kit或是来自Supplier A_II的试剂盒对总RNA逆转录。在ABI PRISM 7900上使用QuantiTect Probe PCR Kit对合成的cDNA进行分析，运用QuantiTect Gene Expression Assays分析IL12A或IL1RN。QIAGEN试剂盒得到的C_T值更低，特别是培养基丰富的IL12A基因（加粗），表明cDNA产量更高。N.D.: Not detected.

RT Primer Mix包含有特别优化的oligo-dT和随机引物的混合物，使cDNA合成可从RNA转录本的各个区域起始，甚至可从5'区域开始。与其他供应商提供的试剂盒相比，QuantiTect Reverse Transcription Kit为real-time PCR分析提供高产量的cDNA，无需考虑待扩增目标序列位于转录本的哪个区域，检测低丰度的基因也具有更高灵敏度。同时，QuantiTect Reverse Transcription Kit也确保了real-time RT-PCR结果更好的重复性。

原理

操作流程