产品简介

本试剂盒提供了所有的用于 cDNA 第一链合成的试剂，其中的 TIANScript Ⅱ RTase 为改良后的莫洛尼氏鼠白血病病毒反转录酶（M-MLV），改良后的新型 RTase 具有更高的模板亲和力和更低的 RNase H 活性，因此使其在 cDNA 第一条链的合成过程中具有通读复杂二级结构模板和反转录长片段 cDNA 的能力。产品中配备的 5× TIANScript Ⅱ RTase Buffer 经过精心的优化，既保证了新型 RTase 的高效酶活，又拓宽了 RNA 模板量的加入范围，使得反转录出来的 cDNA 具有更好的质量以便用于后续的实验分析。

产品特点

■ 酶活效率高：高效的反转录酶活性，后续实验兼容性好。

■ 底物范围广： 适用于所有 RNA， 尤其是具有复杂二级结构的 RNA 模板。

■ 反转片段长：cDNA 第一链合成可以达到 12 kb。

下游应用

■ cDNA 第一链的合成。

■ cDNA 文库的构建。

■ 一步法 RT-PCR。

■ RACE 分析。

实验结果

TIANScript Ⅱ cDNA 第一链合成试剂盒不同长度片段的反转录能力

实验材料：人类贴壁细胞总RNA。
RT-PCR 起始量：2 μl 反转录产物（50 ng/μl)
实验方法：反转录：参照KR107 说明书进行操作。
实验结果：以上为1 μg 总RNA 反转录后取2 μl 反转录产物进行
10 个长度不同的目标基因的扩增图。
扩增体系(PCR): 20 μl；上样量：5 μl；
Marker：D15000+1kb DNA Ladder；胶浓度：1%；
电泳条件：6 V/cm，20 min各泳道图示：M：DNA Marker； 1：产物长度120 bp；2：产物长度：1 kb； 3：产物长度：2.5 kb；4：产物长度：3.2 kb； 5：产物长度：4.6 kb；6：产物长度：6.8 kb； 7：产物长度：7.6 kb；8：产物长度：8.9 kb； 9：产物长度：10 kb；10：产物长度：12 kb。

TIANScript Ⅱ cDNA 第一链合成试剂盒与其他公司产品在长片段模板反转录过程中，效率和特异性的对比

实验材料：人类贴壁细胞总RNA。
RT-PCR 起始量：2 μl 反转录产物（50 ng/μl)
实验方法：反转录：参照KR107 说明书进行操作。
实验结果：以上为1 μg 人类贴壁细胞总RNA 为模板，同时使用某进口
品牌M-MLV 和TIANScript II RT Kit 反转录后进行6 个长度不同的目标基因的扩增对比图。
扩增体系(PCR): 20 μl；上样量：5 μl；
Marker：DNA MarkerIII; 胶浓度：1%；
电泳条件：6 V/cm，20 min。
各泳道图示：M: DNA Marker；1：TIANScriptII RT Kit 反转录cDNA 的扩增结果；2：进口同类产品反转录cDNA的扩增结果；基因1产物长度1.3kb；基因2 产物长度3.0 kb；基因3 产物长度5.0 kb；基因4 产物长度7.5 kb