特点
· 简单且经济高效地引入最敏感的miRNA qPCR系统
· 没有假阳性,只有真正的miRNA信号
· 包括模板中的RNA尖峰和用于监控性能的对照引物集
· 包含执行小规模实验所需的所有内容
· 快速且非常简单的协议
产品详情
miRCURY LNA miRNA PCR Starter Kit包含8-64次miRNA反转录试剂,10μl×200次SYBR Green定量试剂,内参引物(miR-103a-3p,可用于多种种属),外参引物,外参以及赠送2条目标miRNA引物,上样为含有10pg - 5μg起始总RNA。
GeneRead DNAseq Gene Panels能够对特定的一组基因进行可靠的遗传变化分析,适用于二代测序应用。该产品提供的多重PCR引物用于扩增研究所需的一组基因或与某种疾病相关的基因的外显子。GeneRead DNAseq Gene Panels还可依据您选择的基因提供定制产品,以满足您的实验需求。高品质的引物设计和靶向扩增试剂确保扩增的位点覆盖全面、无偏差、特异性高,保留您珍贵样本中即便是少量的遗传变异信息。
性能
无与伦比的灵敏度
通用逆转录与LNA增强和Tm标准化引物相结合,能够从低至1pg的总RNA中准确可靠地定量单个miRNA(参见图:从低至1 pg总RNA起始材料的精确定量)。由于具有极高的灵敏度和极低的背景,您可以在不进行预扩增的情况下准确地定量非常低水平的miRNA。这使得miRCURY-LNA-miRNA PCR系统适用于所有类型的样本,特别是那些RNA含量低的样本,如血清、血浆和其他生物流体。
从低至1pg总RNA起始材料的精确定量。
显示了来自人AM6000总RNA的连续稀释的数据。所有miRNA分析均显示线性读数,相关系数R2>0.99。
原理
用于定量、实时RT-PCR的高性能试剂
miRCURY LNA RT Kit
该试剂盒包括在单个反应步骤中进行快速和方便的miRNA多腺苷酸化和逆转录所需的所有试剂。与需要miRNA特异性第一链合成的系统相比,使用单个通用RT反应作为后续PCR扩增的模板大大简化了程序(参见图:通用逆转录步骤的好处)。UniSp6 RNA尖峰可与对照试验(UniSp6 miRCURY LNA miRNA PCR试验(分类号YP000203954))一起使用,作为逆转录阳性对照和/或作为我们的miRNA PCR面板中的板间校准器。
通用逆转录步骤的好处。
每个RNA样本进行一次通用RT反应不仅可以节省试剂和宝贵的样本,还可以节省您的时间。
miRCURY LNA SYBR Green PCR Kit
该试剂盒包含用于定量实时PCR扩增的高性能miRCURY SYBR Green主混合物。该检测基于SYBR Green,其允许通过熔融曲线分析对所得PCR扩增子进行质量控制。LNA增强引物组需要特定的PCR反应条件以获得最佳性能。该试剂盒还包括设计用于扩增miRCURY LNA RT试剂盒中提供的合成RNA尖峰的对照引物组。有关详细信息,请参阅miRCURY LNA RT Kit 说明书。已使用miRCURY SYBR Green Master Mix验证了miRCURY LNA miRNA PCR Assays and Panels ;qPCR使用其他试剂将影响结果。
步骤
The miRCURY LNA miRNA PCR Assay 系统是一种基于miRNA特异性LNA的系统,设计用于通过使用SYBR Green的定量实时PCR敏感和准确地检测miRNA。该程序的第一步是通用逆转录,然后用LNA增强引物进行实时PCR扩增。
应用
mirCURY LNA miRNA PCR Starter Kit 用作mirCURY PCR系统的一部分,用于:
· miRNA定量实验的设置
· miRNA对照实验
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