特点
· 无酚方案——无需相分离或在罩下工作
· MinElute柱允许较小的洗脱体积(约20µl)
· 所有下游应用的一致、纯RNA
产品详情
miRNeasy Serum/Plasma Advanced Kit 能够从至少200µl的样品中分离总RNA,包括miRNA。无酚方案允许在试验台上执行所有步骤,无需进行相分离,使试剂盒适用于自动化,例如在QIAcube连接上。该试剂盒包括经过严格超净生产工艺的UCP柱,以确保高纯度RNA洗脱液。
性能
miRNeasy Serum/Plasma Advanced Kit 提供了一种无酚的替代品,其RNA产量和质量与miRNeasy Serum/Plasma Kit 相似。miRNeasy Serum/Plasma Advanced Kit 从血清和血浆样品中有效分离总RNA,包括miRNA,最低输入量为200µl。无酚方案使用易于自动化的MinElute离心柱技术,无需真空泵(见下图)。溶解细胞外小泡以允许分析小泡内外的RNA。与其他供应商的试剂盒不同,miRNeasy Serum/Plasma Advanced Kit 结合了易用性和无酚方案,在RNA质量或产量方面没有任何妥协。
原理
为了分析完整的血浆RNA含量,包括细胞外小泡内的RNA,使用与血浆样品混合的缓冲液RPL以确保有效的裂解。该试剂盒包括缓冲液RPP,其沉淀污染物,如血浆蛋白。该套件采用基于旋转柱技术的协议。首先将样品施加到旋转柱以结合总RNA,并且在最终离心步骤中洗脱样品之前,在随后的洗涤和离心步骤中去除任何不想要的分析物或污染物。
操作流程
将血清或血浆(200µl)与缓冲液RPL混合,以从血浆蛋白和细胞外小泡中释放和稳定RNA。然后将样品与缓冲液RPP混合并离心以沉淀蛋白质。向上清液中加入异丙醇,以提供RNA分子(>18个核苷酸)与二氧化硅膜结合的适当条件。然后将样品应用于RNeasy UCP MinElute离心柱,其中RNA与膜结合,其他污染物在随后的洗涤步骤中被洗掉。在最后一步中,总RNA(>18个核苷酸)用不含RNA酶的水洗脱。
应用
miRNeasy Serum/Plasma Advanced Kit 从血浆或血清中分离总的无细胞和外体RNA。下游应用包括:
· 生物标志物发现
· 表达式分析
· 下一代测序
· 定量、实时RT-PCR
· 微阵列分析
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