miRNeasy FFPE Kit确保从福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)的组织切片中纯化含约18个核苷酸以上的总RNA。试剂盒能够回收可用的RNA片段,包括miRNA和其他小RNA,用于定量real-time RT-PCR等下游应用。
使用miRNeasy FFPE Kit纯化的总RNA和miRNA的产量和性能优于采用其他方法纯化的miRNA,如使用苯酚-氯仿抽提或者其他供应商的类似试剂盒。
用福尔马林固定的组织导致RNA-RNA和RNA-蛋白质交联,从而影响了RNA在下游应用中的表现。miRNeasy FFPE Kit提供了独特的裂解和孵育条件,可逆转福尔马林对RNA造成的交联。特别研制的的裂解缓冲液有效地将RNA从组织切片中释放出来,同时避免了RNA的进一步降解。裂解产物用DNase消化,然后优化的结合条件能够纯化含约18个以上核苷酸的所有可用的RNA。
所有的miRNeasy FFPE操作流程都可在85分钟之内完成。优化的裂解缓冲液能够用蛋白质酶K消化样本裂解产物,仅需15分钟而且不损耗RNA产量。裂解后,在80°C下孵育样本15分钟逆转福尔马林交联。然后,在优化的DNase消化步骤中,用DNase Booster Buffer快速去除基因组DNA,并且用RNeasy MinElute离心柱纯化浓缩的RNA(参见下图)。由于RNA的洗脱体积仅有14–30 µl,在下游应用中可实现较小的反应体积。
miRNeasy FFPE Kit能够纯化包含miRNA的总RNA,并且适用于多种下游应用,如定量real-time RT-PCR。
Features | Specifications |
Applications | PCR, qPRC, real-time RT-PCR, microArray |
Elution volume | 14-30 µl |
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | miRNA, total RNA |
Sample amount | up to 4 sections, each with a thickness up to 10 µm and a surface area up to 250mm^2 (automated protocol on QIAcube: up to 2 sections) |
Processing | Manual (protocol for automated processing on QIAcube available) |
Main sample type | FFPE tissue samples |
Format | Spin column |
Technology | Silica technology |
Yield | Varies |
快速启动实验方案 (2)
1、miRNeasy FFPE Kit Quick Start Protocol Part 1 (EN)
2、miRNeasy FFPE Kit Quick Start Protocol Part 2 (EN)
产品介绍与指南 (7)
1、Discover the Real Potential of FFPE Samples
2、iPP QIAGEN FFPE solutions for your samples
3、All insights start with the sample: Your comprehensive guide for isolating top-quality RNA
4、microRNA Sample and Assay Technologies (eBook)
5、microRNA Sample and Assay Technologies - (EN)
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